3月29日，國家質(zhì)檢總局和國家標(biāo)準(zhǔn)委聯(lián)合發(fā)布了有關(guān)蘇丹紅檢測方法國家標(biāo)準(zhǔn)——《食品中蘇丹紅染料的檢測方法  高效液相色譜法》（GB/T 19681-2005）。該標(biāo)準(zhǔn)已于發(fā)布之日起實(shí)施。

    這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)適用于食品調(diào)味料和食品成品中蘇丹紅的檢測，克服了單純采用歐盟標(biāo)準(zhǔn)的不足，如定量不夠精確且不適于食品成品中蘇丹紅的檢測。相對于歐盟標(biāo)準(zhǔn)所要求的儀器、試劑等方面較高的成本而言，這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)要求的儀器、試劑等方面的成本較低，我國絕大部分縣級技術(shù)機(jī)構(gòu)都可以根據(jù)這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施檢測。

適用于大部分技術(shù)機(jī)構(gòu)
                     
    蘇丹紅在我國的食品中被發(fā)現(xiàn)時，我國檢測蘇丹紅的一個主要依據(jù)是歐盟標(biāo)準(zhǔn)。使用歐盟標(biāo)準(zhǔn)所要求的液質(zhì)聯(lián)用儀對食品中的蘇丹紅進(jìn)行檢測，必須對復(fù)雜的色譜結(jié)果進(jìn)行質(zhì)譜確證，一臺液質(zhì)聯(lián)用儀的價值高達(dá)300多萬元，使用該儀器對消耗的試劑的純度及操作的人員的水平都有極高的要求。在我國的使用受到限制，我國目前絕大多數(shù)質(zhì)檢機(jī)構(gòu)都不具備液質(zhì)聯(lián)用儀，少數(shù)有儀器的機(jī)構(gòu)受人員、試劑等限制也不能很好利用。

    按照我國發(fā)布并實(shí)施的蘇丹紅檢測方法國家標(biāo)準(zhǔn)，各地技術(shù)機(jī)構(gòu)需要配置或購置的試劑與標(biāo)準(zhǔn)品有丙酮、正己烷、無水硫酸鈉、層析用氧化鋁（中性）、層析柱管、乙腈、乙醚、無水甲酸及蘇丹紅I～I(xiàn)V標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、標(biāo)準(zhǔn)儲備液；需要配置的儀器設(shè)備包括高效液相色譜儀、分析天平、梯度泵、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、紫外檢測器、C18色譜柱（4.6x150cm）、勻槳器、離心機(jī)等。其中，高效液相色譜儀的市場價格約4萬元，這種儀器在市級以上的技術(shù)機(jī)構(gòu)中已普遍配置，發(fā)達(dá)地區(qū)的縣級技術(shù)機(jī)構(gòu)一般也配置了高效液相色譜儀。除此以外，其他的儀器和試劑都是非常普遍的。需要注意的是，由于不同廠家和同一廠家不同批號的氧化鋁產(chǎn)品在活性性能上有很大的不同，很難將其統(tǒng)一精確地控制在一個活度上。標(biāo)準(zhǔn)制定過程中，技術(shù)人員將氧化鋁在105℃的條件下進(jìn)行兩個小時的活化處理，冷卻后加入適量的蒸餾水滅活，用20ml的丙酮配2%濃度正己烷洗脫，用肉眼觀察洗脫液的顏色和柱上殘留的顏色就可以評價是否可以使用。

　　蘇丹紅檢測方法國家標(biāo)準(zhǔn)采用了簡單的正相吸附固相萃取原理，一次性去除了樣品中紅辣椒和番茄中的干擾成分，使用目前國內(nèi)已普及應(yīng)用的高效液相色譜儀就可準(zhǔn)確完成4種蘇丹紅染料的檢測。制定這項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)時確定了科學(xué)的方法流程，這一流程也是實(shí)際檢測時應(yīng)遵循的檢測流程，即樣品制備-稱樣-分散-提取-離心-分出上清-蒸干-正己烷溶解-固相萃取-洗脫-定容-上機(jī)。據(jù)介紹，這種檢測易于操作，只要配備了相應(yīng)的儀器，關(guān)鍵是高效液相色譜儀，我國縣級以上技術(shù)結(jié)構(gòu)的檢測人員均可以依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)對食品中的蘇丹紅含量進(jìn)行有效的檢測。

　　據(jù)大連市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所有關(guān)人士介紹，標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施后，有一些縣級技術(shù)機(jī)構(gòu)在檢測遇到問題時向該所的技術(shù)人員咨詢，很多問題在電話中幾句話就說明白了。

適用于食品成品的檢測
                     
    歐盟標(biāo)準(zhǔn)方法即《辣椒粉及以辣椒為主要成分的產(chǎn)品中蘇丹紅和胭脂樹橙的含量分析》中使用的檢測儀器是大型液質(zhì)聯(lián)用儀。利用歐盟標(biāo)準(zhǔn)和液質(zhì)聯(lián)用儀對蘇丹紅進(jìn)行檢測，由于受提取和純化的限制，樣品中的蘇丹紅提取率很低，其中，對油性樣品中蘇丹紅的提取率約為60～70%。液質(zhì)聯(lián)用的方法對蘇丹紅的檢出限量較高，即必須在蘇丹紅的含量達(dá)到相對較高的水平時才可以檢出。這種方法對食品調(diào)味料中蘇丹紅的檢測效果很好，但不適合食品成品中蘇丹紅的檢測。

    食品中的蘇丹紅一般都來自食品調(diào)味料。我國雖然有一些初具規(guī)模的食品調(diào)味料生產(chǎn)企業(yè)，但是，食品生產(chǎn)企業(yè)自己制備的和不規(guī)范的小企業(yè)甚至手工作坊生產(chǎn)的食品調(diào)味料還占有相當(dāng)大的比例。僅僅就食品調(diào)味料的生產(chǎn)進(jìn)行監(jiān)管是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，必須為食品中蘇丹紅的檢測提出檢測方法標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。適用于我國國情的檢測方法，不僅要包括食品調(diào)味料，還要包括食品成品。

    已實(shí)施的蘇丹紅檢測方法國家標(biāo)準(zhǔn)采用了簡單的正相吸附固相萃取原理，可以一次性去除樣品中紅辣椒和番茄中的干擾成分；經(jīng)過嚴(yán)格篩選的提取溶劑，可以將目標(biāo)化合物從被分析的樣品中不丟失的完全提取出來；在欠缺質(zhì)譜定性檢測條件下，通過氧化鋁的強(qiáng)吸附作用，可將蘇丹紅從其他的基質(zhì)成分中純化、富集出來；高效液相色譜儀可以準(zhǔn)確完成4種蘇丹紅染料的檢測。這些特點(diǎn)表明，我國的蘇丹紅檢測方法國家標(biāo)準(zhǔn)既適用于食品調(diào)味品，也適用于含蘇丹紅殘留量的食品成品。

高效液相色譜法的特點(diǎn)

    據(jù)標(biāo)準(zhǔn)主要起草人、大連市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所高級檢驗(yàn)師潘煒介紹，高效液相色譜法具有如下特點(diǎn)：

　　適用范圍寬。由于本方法具有高提取率、高純化性能、高濃縮倍數(shù)，既可以用于檢測含蘇丹紅量相對較多的食品，也可以檢測含蘇丹紅量極少的食品。無論何種基質(zhì)的樣品，都可以應(yīng)用本標(biāo)準(zhǔn)對食品中的蘇丹紅進(jìn)行檢測，其中包括干基樣品（如辣椒面）、水基樣品（如番茄沙司）、油基樣品（如辣椒油）、膠基樣品（如醬類）、高蛋白質(zhì)樣品（如肉類）、動物油脂（火鍋底料）等。

　　高提取率。保證檢測取得理想的結(jié)果，首先應(yīng)將目標(biāo)化合物從被檢測的樣品中完全提取出來，本標(biāo)準(zhǔn)選擇正己烷和丙酮為提取溶劑，水和丙酮為分散溶劑。對于純油基的樣品（像辣椒油）采用正己烷直接溶解，可保證提取率達(dá)95%。對于水基的食品（像番茄沙司），經(jīng)水和丙酮分散后采用正己烷提取，也可保證提取率在85%以上。

　　高純化性能。標(biāo)準(zhǔn)確定了中性氧化鋁粉作固相萃取，利用了氧化鋁對蘇丹紅的強(qiáng)吸附能力，并對油脂進(jìn)行飽和性吸附。在前處理時借助極性固相萃取填料一次性將干擾和污染物最大可能除掉，有助于將油性樣品中的大量油脂在隨后的清洗步驟中脫除。實(shí)驗(yàn)表明，氧化鋁可以有效脫除樣品中的干擾成分，使液相譜圖干凈清晰。

  　高濃縮倍數(shù)。由于本方法可獲得純凈的目標(biāo)化合物的洗脫液，因而可以任意比例進(jìn)行濃縮，配合了好的提取率和固相萃取的回收率。也就是說，實(shí)際檢測中可以根據(jù)需要，任意地對目標(biāo)化合物進(jìn)行濃縮，目標(biāo)化合物不因?yàn)楸粷饪s而影響其純凈度，可大大降低檢出限，即不會對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。

  　此外，本方法因除去了內(nèi)源干擾，可發(fā)揮出色譜/光譜圖可準(zhǔn)確地定性定量的優(yōu)勢。

　　本方法經(jīng)全國抽檢、省抽檢、工商抽檢、進(jìn)出口企業(yè)的原料控制等數(shù)十類數(shù)百個樣品的實(shí)測考察，結(jié)果表明，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確和判定正確，從未出現(xiàn)假陽性和假陰性的錯誤，即未發(fā)生過誤判。

中國和歐盟蘇丹紅染料檢測方法的比較
                     
    歐盟的標(biāo)準(zhǔn)方法限于紅辣椒粉的使用，在歐盟的標(biāo)準(zhǔn)方法中已注明適用于辣椒粉和以辣椒為主要成分的產(chǎn)品，即主要指含辣椒的食品調(diào)味品。中國的方法至今還未見到不適應(yīng)的樣品。由于該方法的高提取率、高純化性能、高濃縮倍數(shù)，可同時適用于含蘇丹紅量多的樣品（如辣椒粉、辣椒油等）和含量極少的樣品（如食品成品漢堡包、香腸、肉餅等）。

　　歐盟的方法僅采用乙腈為提取液，對水性基質(zhì)略好（如辣椒粉），但對植物油和動物油的基質(zhì)回收率約在65%以至更低，對蘇丹紅含量較大的樣品可以使用，但不能準(zhǔn)確定量，對含量小的樣品則完全不適用。中國方法對不同基質(zhì)的樣品采用不同的提取，從而保證從各種復(fù)雜基體中所提取的蘇丹紅有最大的回收率，根據(jù)樣品基質(zhì)選擇不同的提取溶劑，才能保證將各種樣品基質(zhì)中的多種蘇丹紅染料一并提取出來。

　　歐盟方法對提取液直接上機(jī)，經(jīng)有機(jī)溶劑提取后的樣品溶液中含有大量的脂肪和脂溶性雜質(zhì)，另外，對于辣椒和番茄制品會提取出大量的內(nèi)源性色素，這些雜質(zhì)一方面影響色譜的分離效果，使得色譜圖上干擾很多，沒有質(zhì)譜幾乎無法定性，還嚴(yán)重污染分離柱。中國方法在前處理時借助極性固相萃取填料將兩類干擾物質(zhì)最大可能除掉，保證定性的正確和分析柱壽命。方法簡單，且選擇的中性氧化鋁對蘇丹紅類染料有很特異的吸附解析特點(diǎn)，自己填柱，可一步完成純化和濃縮。在保證好的氧化鋁活度時，蘇丹紅系列染料吸附解析率可達(dá)到100%，因此純化后的樣品在分析條件下無任何雜峰干擾，在柱純化過程中也能保證目標(biāo)化合物的回收。 

  　歐盟方法受提取溶劑和不進(jìn)行純化的影響，無法進(jìn)行濃縮步驟，因而無法降低檢出限量。中國方法由于可獲得純凈的目標(biāo)化合物的洗脫液，因而可以任意比例進(jìn)行濃縮，配合了好的提取率和固相萃取的回收率，可大大降低檢出限。

　　歐盟方法采用液相色譜—光譜檢測進(jìn)行定量，質(zhì)譜進(jìn)行定性確證，其定性定量能力均不及本方法。我們發(fā)現(xiàn)對于辣椒制品，即使在最穩(wěn)定的色譜條件下，使用極性不同分離柱，也會出現(xiàn)辣椒內(nèi)源物質(zhì)和蘇丹紅的色譜峰的完全重疊，此時光譜圖無法定量，使用質(zhì)譜定量能力則遠(yuǎn)不及光譜。本法因除去了內(nèi)源干擾，可發(fā)揮出色譜/光譜圖可準(zhǔn)確的定性定量的優(yōu)勢。

  　歐盟方法的成本很高，分析成本來源于儀器本身成本、高純試劑成本、儀器損耗成本和人員成本。中國方法在這幾項(xiàng)成本中占絕對優(yōu)勢，在我國極易普及。

背景
                     
    蘇丹紅屬偶氮系列染料，是應(yīng)用廣泛的化工合成染色劑，主要應(yīng)用于蠟、油彩、汽油等工業(yè)領(lǐng)域，目前已確認(rèn)了有機(jī)偶氮染料的毒性，其大多數(shù)有致癌性，包括蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ和蘇丹紅Ⅳ。

　　我國有《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》。這項(xiàng)早在1996年就已發(fā)布的強(qiáng)制性國家標(biāo)準(zhǔn)，允許使用的食品添加劑有800多種，但不包括“蘇丹紅”。也就是說“蘇丹紅”是被國家標(biāo)準(zhǔn)禁止使用在食品生產(chǎn)領(lǐng)域的。

  　我國和歐盟禁止蘇丹紅類染料用于食品生產(chǎn)。2004年6月14日，英國向消費(fèi)者和貿(mào)易機(jī)構(gòu)發(fā)出了警示，在超市食品中發(fā)現(xiàn)含有潛在致癌性的蘇丹紅I。2005年2月18日，英國食品標(biāo)準(zhǔn)管理局宣布收回受污染的359種食品。2005年2月23國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)出緊急通知，在全國展開對含有蘇丹紅食品的抽查行動，要求各地質(zhì)檢部門加強(qiáng)對含有蘇丹紅I食品的檢驗(yàn)和監(jiān)管，嚴(yán)防含有蘇丹紅I的食品流入市場。

知識

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測法

    自2003年4月，印度出口的紅辣椒制品中發(fā)現(xiàn)蘇丹紅I之日起，世界各國均對蘇丹紅的檢測方法進(jìn)行了研究。2004年1月，歐盟將辣椒制品的蘇丹紅的檢測范圍擴(kuò)大到蘇丹紅II、蘇丹紅III、蘇丹紅IV。由于涉及樣品大多是辣椒和番茄制品，樣品本身的復(fù)雜基質(zhì)直接干擾儀器檢測，且蘇丹紅具有非離子性脂溶物的特點(diǎn)，導(dǎo)致樣品提取、純化、富集非常困難，采用好的提取溶劑往往造成提取液中混入大量的干擾成分，若考慮低殘留量進(jìn)行富集往往首先濃縮的是樣品的內(nèi)源性物質(zhì)，結(jié)果使得干擾更為嚴(yán)重。由于這類染料的特點(diǎn)，先進(jìn)國家普遍采用的研究方法是液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)。歐盟標(biāo)準(zhǔn)方法《辣椒粉及以辣椒為主要成分的產(chǎn)品中蘇丹紅和胭脂樹橙的含量分析》中也使用大型液質(zhì)聯(lián)用儀。

　　質(zhì)譜檢測儀具有定性優(yōu)勢，是我國標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布前，檢測蘇丹紅中常用的辦法。已經(jīng)報道的方法有毛細(xì)管液相-電噴霧-飛行質(zhì)譜法，液相色譜-大氣壓化學(xué)電離-多極質(zhì)譜法和液相質(zhì)譜-電噴霧質(zhì)譜法，均屬于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測法。該方法經(jīng)過液相分離、光譜定量、質(zhì)譜定性而最終實(shí)現(xiàn)對食品中蘇丹紅的檢測。液質(zhì)聯(lián)用儀的先進(jìn)性毋庸置疑。